...准 动物性食品中对乙酰氨基酚残留量的测定高效液相色谱法6页

黄潇潇

[摘 要]目的：建立小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚的测定方法。方法：采用标准化的色谱柱，以甲醇一水（40：60）为流动相，检测波长275 nm，对进样量进行合理控制。结果：对乙酰氨基酚在标准条件下线性良好，平均回收率为116.6%。结论：该法简便快速、重复性好，可用于该制剂的质量控制。

[关键词]小儿氨酚黄那敏颗粒；对乙酰氨基酚；高效液相色谱法；含量测定

中图分类号：TM459 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）10-0343-01

小儿氨酚黄那敏颗粒是一种临床比较常用的复方制剂，主要适用于缓解儿童普通感冒及流行性感冒所引起的发热、头痛以及打喷嚏、流鼻涕等症状，具有较好的应用价值。现行标准中对小儿感冒药中乙酰氨基酚的含量测定存在一定的局限性，因而采取高效液相色谱法对小儿氨酚黄那敏颗粒中乙酰氨基酚进行含量测定，具有重要的现实意义，并取得了较好的测定效果。

1 测定实验中仪器与试药

在高效液相色谱法测定小儿感冒药中乙酰氨基酚含量的实验中，选用国外先进的高效液相色谱仪和二级管阵列检测器作为乙酰氨基酚含量测定的专用设备，确保这两种设备的实际性能满足实验的标准。先用专业化的超声波清洗器和电热恒温鼓风干燥箱，确保乙酰氨基酚含量测定的精准性和可靠性，与此同时，选用国外先进的紫外分光光度计，以促进含量测定实验的顺利进行。

在试药方面，选用乙酰氨基酚的对照品，确保其质量和规格满足国家药品生物制品检验标准，与此同时进行甲醇、娃哈哈纯净水的配备。所选用的小儿氨酚黄那敏颗粒均购自于不同的厂家，其中每袋内乙酰氨基酚以及人工牛黄等的含量具有一定的一致性。

2 实验方法与结果

2.1明确色谱条件。在高校液相色谱法对小儿氨酚黄那敏颗粒中乙酰氨基酚的含量进行测定的实验操作中，对色谱条件以及流动相进行明确，流动相为甲醇-水，并将实际流速和进样量控制在合理范围内，对实验中的检测波长进行明确，乙酰氨基酚对照品与样品的色谱图分别建图1。

2.2对照品溶液的制备操作。在本实验中，精密称取标准温度条件下干燥至标准重量的乙酰氨基酚的对照品适量，置于容量瓶内，并通过娃哈哈纯净水进行稀释，至刻度后进行摇匀，即可能到标准的乙酰氨基酚对照品溶液。

2.3样品溶液的制备操作。在本实验中，分别选取购买自不同厂家的不同规格的小儿氨酚黄那敏颗粒数袋，经研磨至标准形态后，精密称取适量并置于标准的容量瓶内，加哇哈哈纯净水进行稀释，稀释至刻度后可采用专业的滤膜进行过滤，留作备用。

2.4对实验中的线性关系进行测定和明确。在实验过程中，分别称取对照品溶液适量，加入50ml容量瓶内进行定容操作，并对定容后的浓度进行准确的记录，从而得出色谱流出曲线。在此基础上，以乙酰氨基酚浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，做标准化的线性回归方程，线性回归显示，乙酰氨基酚浓度范围与峰面积具有良好的线性关系。

2.5对实际精密度进行准确的测定。在本实验中，对同一种对招聘溶液进行重复进样操作，并对每次进样的对照品溶液的量进行合理的控制，可以发现本实验过程中仪器具有良好的精密度。

2.6进行重复性试验操作。在本实验中，按照色谱条件，对药品供试品溶液进行重复进样，并对各种药品溶液中的乙酰氨基酚色谱峰峰面面积进行明确，实验表明高效液相色谱法具有良好的重复性和应用性。

2.7对稳定性进行测定。在实验过程中，严格按照色谱条件进行进样操作，并对峰面积进行准确的记录，实验结果显示，实验中样品溶液在5小时之内具有较好的稳定性。

2.8对加标回收率进行准确的测定。在实验中，选取同一批的含量已定的小儿氨酚黄那敏颗粒样品适量，分别加入对乙酰氨基酚适量，在高效液相色谱法测定条件下进行测定，可以明确乙酰氨基酚的总平均回收率，详情见表1。

2.9对样品进行准确可靠地测定。在实验过程中，选取处理好的标准样品溶液适量，按照高效液相色谱条件进行测定，并严格按照外标法对乙酰氨基酚含量进行计算，实际样品含量均在80%以上。

3 讨论

3.1溶剂的选取。实验研究显示，以流动相和纯净水分别作为溶剂对乙酰氨基酚含量进行测定，发现并不存在明显差异，因而在高效液相色谱法对小儿感冒药中乙酰氨基酚含量进行测定时，可以选用廉价易得的纯净水作为溶剂，来对式样样品进行溶解操作。

3.2对流动相进行选取。相关资料研究显示，高效液相色谱法进行乙酰氨基酚含量测定的过程中，流动相对位甲醇、三乙胺溶液、磷酸溶液等。而在本实验中，主要采用甲醇：水（40：60）作为流动相，实际操作具有一定的便捷性和可靠性，操作简单且出峰时间较快。对实验结果进行观察和分析可以发现，甲醇：水（40：60）作为流动相时，实际分离度较高且峰形对称，试验后色谱柱的冲洗也比较简便，具有良好的适用性。

3.3测定波长的选择。对对乙酰氨基酚紫外吸收波长进行测定，结果显示样品溶液在275 nm处有最大吸收。因此本实验选择275 nm作为检测波长。此时检测基线稳定，对乙酰氨基酚前后杂质干扰小。

3.4高效液相色谱法，又称“高压液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

高效液相色谱法分析速度快、载液流速快，分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。应用范围广，百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

参考文献

[1] 闫海燕-高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚的含量《安徽医药》，2011.

[2] 刘旺培，黄义纯 -高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚的含量《首都医药》，2008.

[3] 闫海燕 -高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中对乙酰氨基酚的含量《化学与生物工程》-2011.