盐酸氟桂利嗪
由金玲
[摘 要]目的：通过对盐酸氟桂利嗪采用RP-HPLC的方法进行含量与含量均匀度的检测，证实该方法的有效性。方法：选择型号为AgelaMPC18的色谱柱，色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μM。提取一定含量的甲醇-磷酸盐缓冲液，其中包含磷酸二氢钾的含量1.36g，将其放置在容积为1000mL的水中进行稀释，并且在稀释的溶液中再加入适量的三乙胺4mL，不断调节溶液的pH值，直至达到3.5为止。将最终完成的溶液当做流动相放置在一旁备用，调节流速，一般情况下以0.8mL·min-1为宜。同时将所检测的波长控制在253nm，将柱温调节至30℃，将进样量控制在20μL。结果：最终对盐酸氟桂利嗪进行检测，当其处在浓度范围为3.7～24.6μG·ML-1时，可以达到良好的线性关系，r=0.9999，并且平均回收率也可以达到99%以上，其中RSD可以控制在0.9%。结论：采用这种检测方法不仅简单便捷，具有较高的重复性，同时还能保证检测结果的准确性，因此可以得到进一步的推广。
[关键词]反相高效液相色谱；盐酸氟桂利嗪片；含量测定；含量均匀度
中图分类号：U564 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）10-0340-01
在由钙缺失引起的疾病中，盐酸氟桂利嗪片是一种应用范围较广的钙通道阻断剂，通过服用盐酸氟桂利嗪片可以有效的避免细胞损伤，避免血管产生痉挛等现象，因此是一种效果十分明显的药物。与一般的药物相比，盐酸氟桂利嗪片更加有效，与脑益嗪相比较，其效果要强于脑益嗪的15倍以上。更是在偏头痛以及丛集性头痛的过程中发挥着显著的效果。在预防以及治疗的过程中，可以说盐酸氟桂利嗪片是一种十分有效的药物。除此之外，盐酸氟桂利嗪片还可以应用在其他的疾病预防与治疗过程中。例如脑动脉硬化与脑供血不足的脑卒中恢复期中等，因此对于盐酸氟桂利嗪片的质量标准的检验就更为必要了，只有严格控制其含量，才能确保真正的发挥功效。通常采用的紫外线-可见光检测方法中，主要是以吸收系数为指标进行计算。本文所采用的方式为RP-HPLC法，在色谱条件下进行检测，具有简单方便的特点，并且还能保证检测结果的准确性，是一种有效的检测方法。
1、检测设备与试剂
1.1 检测设备
本试验中主要采用的设备为高效液相色谱仪，型号为Agilent1100，其中包含的具体仪器为在线脱气机，型号为G1322A；四元泵，型号为G1310A；自动进样器，型号为G1313A；柱温箱，型号为G1316A；紫外检测器，型号为G1314A；高效液相色谱仪，型号为WAteRS2695；二极管阵列检测器，型号为2996；电子天平，型号为METTLERAX205DR。
1.2 试剂
根据国家药品检定部门的相关规定，选用一定剂量的盐酸氟桂利嗪及其对照品，生产批号为100844-200802，盐酸氟桂利嗪的原料选用某生物制药有限公司生产的某一批号的药品，另盐酸氟桂利嗪片选用与原料生产公司不同的另外两个制药公司所生产的产品，选择不同批号的药品进行对比。另外，色谱纯的选用以甲醇为主，其中所用到的水则选用了ELGA制超纯水，分析纯为磷酸二氢钾。
2、检测方法以及结果
2.1 色谱条件
首先，在选择色谱柱时，本试验根据实际的要求以及相关规定，最终决定采用型号为AgelaMPC18的色谱柱，其规格标准为4.6mm×250mm，5μm，其中甲醇为流动相，提取出1.36g的磷酸二氢钾，在其中加入适量的水进行稀释，最终将其稀释成为容积为1000mL的磷酸盐缓冲溶液。在其中加入适量的三乙胺，本试验中所加入的含量为4mL。并且不断调整其pH值，最终达到3.5。溶液的流速为0.8mL·min-1。所检测的波长为253nm，柱温为30℃，将进样量控制在20μL以内。
2.2 溶液的制备
2.2.1对照品溶液
精密称取盐酸氟桂利嗪对照品12mg，置100mL量瓶中，加乙醇10mL，振摇使溶解，加溶剂（稀盐酸24mL加水至1000mL）稀释至刻度，摇匀；精密称取5mL置50mL量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.2含量测定用供试品溶液
取盐酸氟桂利嗪片10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于氟桂利嗪10mg），置100mL量瓶中，加乙醇10mL，振摇使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.3含量均匀度测定用供试品溶液
取本品1片，置100mL量瓶中，加乙醇及溶剂各5mL，超声使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液10mL，置50mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.4空白辅料溶液
取处方量空白辅料0.22g，置100mL量瓶中，加乙醇10mL，振摇使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
2.3 方法学考察
2.3.1线性关系
精密称取对照品12.31mg，置100mL量瓶中，加乙醇10mL，振摇使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得对照品储备液。精密量取该储备液0.3、0.7、1.0、1.5、2.0mL，分别置于10mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，制得系列浓度对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积A为纵坐标，进样浓度C（Μg·mL-1）为横坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得到线性方程：A=7.6375×10C-2.0286×10R=0.9999。结果表明，盐酸氟桂利嗪浓度在3.7～24.6mg·mL-1范围内呈良好线性关系。
2.3.2精密度试验
在上述色谱条件下，取“2.2.1”项下对照品溶液，连续进样6次，测得峰面积的RSD为0.12%，表明仪器精密度良好。
2.3.3稳定性试验
取同一供试品溶液（批号：100201），分别在0、2、5、8、11、14h进样，测定峰面积的RSD为0.20%，表明14h内测定结果稳定。
2.3.4回收率试验
精密称取盐酸氟桂利嗪原料8.4、9.6、12、14.4、15.6mg（相当于处方量70%、80%、100%、120%、130%），分别置100mL量瓶中，再分别加入处方量辅料适量，加乙醇10mL，振摇使溶解，加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，分别取20μL注入液相色谱仪，结果5个浓度平均回收率（n=2）分别为99.5%、98.8%、101.7%、99.6%、99.9%，平均偏差分别为0.2%、0.6%、0.5%、0.8%、0.3%。平均回收率（n=10）为99.9%。表明本法准确性良好。
2.3.5干扰试验
取“2.2.4”项下空白辅料溶液和流动相各20μL分别注入液相色谱仪，在主成分保留时间处均未发现色谱峰，表明辅料及流动相均不干扰测定。
2.4 样品测定
按“2.2.2”项下方法制备不同批号样品的供试品溶液各2份，按“2.2.3”项下方法制备不同批号样品的供试品溶液各10份进行测定。结果如下。
3、讨论
有关HPLC法测定盐酸氟桂利嗪及制剂含量多有报道，但HPLC法同时测定盐酸氟桂利嗪片含量及含量均匀度未见报道。本文参照《中国药典》盐酸氟桂利嗪胶囊含量测定项下色谱条件，测得盐酸氟桂利嗪理论板数为14239，对称因子为1.0，能够满足测定要求。传统对盐酸氟桂利嗪片的含量进行检测的过程中主要采用紫外-可见分光光度的方法，目前则主要运用HPLC法进行检测，事实证明，这一检测方法具有高效便捷的特点，因此值得推广。
参考文献
[1] 国家药典委员会编.中国药典临床用药须知化学药品和生物制品卷[M].2010版.北京：中国医药科技出版社，2010：91-91.
[2] 卫生部药品标准中药成方制剂[S].第十二册：65-65.
[3] 中国药典[S].二部，2010：748.
