[仪器使用说明] 【百家讲堂第14期】高效液相色谱在药物分析中的应用-...

宋艳恒++王瑾

[摘 要]高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上，于上世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的新型分离分析技术，因为其具有“三高一广一快” 的特点— 高压、高效、高灵敏度、应用范围广以及分析速度块和载液流速快，当前被广泛的应用在对药品的质量分析之中。本文重点探讨高效液相色谱法的分离原理、技术发展情况以及其在药品质量分析中的应用等。

[关键词]高效液相色谱法；药品质量分析；灵敏度

中图分类号：O657.72 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）16-0356-01

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”以及“近代柱色谱”等。高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，它原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。高效液相色谱法目前被广泛的运用于医学药品质量分析领域，成为了药品质量监控的关键技术。本文主要对高效液相色谱法的分离原理、技术发展情况以及其在药品质量分析中的应用等进行分析和探讨。

一、高效液相色谱法的原理与特点

（一）高效液相色谱法的原理

高效液相色谱法作为色谱法的一个重要分支，按照分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法、离子交换色谱法以及分子排阻色谱法[1]。其原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

（二）高效液相色谱法的特点

高效液相色谱法具有“三高一广一快”的特点—高压、高效、高灵敏度、应用范围广以及分析速度块和载液流速快。高压是指流动相为液体，流经色谱柱时受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液施以高压；高效是指高效液相色谱法分离效能高，可选择固定相和流动相已达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高处很多倍；高灵敏度指紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级；应用范围广指百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势；分离速度快和载液流速快是指高效液相色谱法较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在半个小时之内即可以完成，有些样品甚至在几分钟内即可完成，一般样品的分析时长均小于1小时。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长、相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽、柱效率降低[2]。同时，高效液相色譜检测器的灵敏度也不及气相色谱。

二、高效液相色谱法的技术发展

高效液相色谱法作为上世纪60年代后期逐渐发展起来的一种新型分离分析技术，经过不断的改进和完善，当前已经实现与一些高端检测仪器的融合，给高效液相色谱法的技术发展带来了新的机遇，这都使得高速液相色谱法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域的应用变得越来越广泛。特别是医学领域的药品检测分析，作为保障国民医疗卫生质量的重要环节，高效液相色谱法在其中更是扮演着不可或缺的角色。

经过调查研究发现，目前百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分离分析，特别是高沸点、大分子、强极性热稳定性差化合物的分离分析[3]。伴随着高效液相色谱法的不断创新升级，灵敏度、分离效能、分析效率更高以及应用领域更广泛已经逐步成为了高效液相色谱法的主要发展目标，在不久的将来一定可以发挥更为巨大的作用。

三、高效液相色谱法在药品质量分析中的应用情况

（一）药品有效成分含量的检测

高效液相色谱法作为药品有效成分含量的常用分析方法，在进行药品有效成分含量测定时，除了需要测定要药品主要成分的含量外还要测定其他成分的含量，此时可以体现高效液相色谱法在消除药品共存成分之间彼此影响的测定优势。作为医学基本常识，天然药品一般来说具有复杂的成分和多种有效成分，由于其中不同有效成分之间相互干扰，因此常规的测量方法往往存在较大的误差。但是经过诸多专家的实践运用发现，高效液相色谱法由于其分析机制的优势，可以有效的避免各个成分之间的影响，从而实现在药品有效成分检测中的高精确度[4]。

（二）药品杂质含量的检测

随着国家对药品质量管控相关文件的下发，作为保障国民医疗卫生质量的重要环节，药品质量检测近年来变得越来越严格。众所周知，药品的生产过程通常由于生产工艺以及其他多种因素导致药品中掺杂一些杂质成分。如果药品中的杂质成分超过相关行业标准，不仅会影响药品的使用效果，还可能对患者的健康造成一些负面作用。因此，必须在药品质量检测中引入高效能的检测方法以降低患者的使用风险。比如抗生素的使用就是一把双刃剑，抗生素的合理使用挽救了很多人的生命，但是如果其中的杂质成分超过相关行业标准，就会给患者带来严重的风险，甚至危及患者的生命安全。当前，高效液相色谱法由于其检测高灵敏度的特点被广泛的应用于抗生素等一系列药品中杂质含量的检测，降低了患者的使用风险，为国民的医疗卫生质量提供了给有力的保障。

四、高效液相色谱法在药品质量控制中的应用情况

由于人们一些不良的生活和饮食习惯，当前许多疾病的发病率都有不小的上升。为了保证人们的生命健康安全，近年来，国家对于医药行业的药品质量管控更加严格，出台了不少医药行业的相关文件。随着高效液相色谱法的不断创新升级，其在医学、化工以及食品等多个领域的应用得到大力普及。目前，高效液相色谱法已经取代一些传统药品检测技术被写入多个国家的药典之中，消除了以往药品检测技术在药品检测上的诸多弊端。由于高效液相色谱法在药品检测中具备“三高一广一快”的巨大优势以及其与质谱等其他技术的融合度较高，因此其在未来的药品检测分析上必将发挥更为巨大的作用。

结语

高效液相色谱法作为当前医药行业最为常见的药品检测分析技术，具有“三高一广一快”—高压、高效、高灵敏度、应用范围广以及分析速度块和载液流速快的优势，能够精确、快捷地检测出药物的有效成分等其他成分，为现代药物的质量管控做出了巨大的贡献。“保障和改善民生没有终点，只有连续不断的新起点”。随着我国医疗事业的快速发展以及国家对于保障和改善民生的高度重视，药品质量检测势必会被放到一个更加重要的地位。高效液相色谱法由于自身在药品检测上“三高一广一快”的优势已经发挥出了巨大作用。不久的将来，随着高效液相色谱法的发展升级，一定可以在药品检测上发挥出更为重要的作用，为我国的医疗事业的发展起到更大的推动作用，为实现保障和改善民生这一重大的目标提供更有力的保障。

参考文献：

[1] 吴战海.高效液相色谱法在药品质量分析中的应用进展[J].黑龙江科技信息，2017，04：118.

[2] 白亚琴.高效液相色谱技术在药品检验中的应用及进展研究[J].生物技术世界，2015，03：1.

[3] 王绪明.高效液相色谱在药物毒物分析中的应用进展[J].光谱仪器与分析，1996，03：15-19.

[4] 辛颖.高效液相色谱技术在药品检验中的应用及进展探讨[J].黑龙江科技信息，2012，31：15.